Modificeret Spike mRNA: Der er ingen 'ønskede proteiner'

Alle skaderne fra COVID-19-injicerbare produkter var forudsigelige og kunne forebygges.

Jessica Rose, PhD

A Natur udgivelse af Mulroney et al. Med titlen N¹-methylpseudouridylering af mRNA forårsager +1 ribosomal frameshifting var offentliggjort den 6. december 2023. Forfatterne viste, at N1-methylpseudouridin påvirker troværdigheden af ​​mRNA-translation via ribosom-stop, hvilket resulterer i produktionen af ​​flere, unikke og potentielt afvigende proteiner ved frameshifting.

For at løse bekymringer forbundet med disse resultater, Wiseman et al. hurtigt skrevet Ribosomal rammeskift og fejllæsning af mRNA i COVID-19-vacciner producerer "off-target"-proteiner og immunresponser, der fremkalder sikkerhedsproblemer: Kommentar til britisk undersøgelse af Mulroney et al..

Nogle af bekymringerne opstår fra codon-optimeringen af ​​de modificerede mRNA'er til brug i COVID-19-produkterne. Kodonoptimering blev udført for at opnå maksimal proteinekspression hos mennesker. Det er baseret på det faktum, at specifikke organismer foretrækker at bruge specifikke kodoner kaldet codon bias. Vi kan udnytte codon bias ved at lave mRNA'er i henhold til proteinværtsproducenten ved hjælp af synonym kodonerstatning, for at øge translationseffektiviteten og proteinekspression, uden at ændre proteinets sekvens.

Det er dog velkendt codon-optimering kan føre til proteinkonformation, foldning og stabilitetsproblemer, hvorved det evt afbryde den finjusterede timing af translation og i sidste ende proteinfunktion. Codon optimering kan også føre til fejlfoldning af mRNA'er på grund af øget Guanin/Cytosin (GC indhold) i den optimerede mRNA.

Synonym kodonudskiftning resulterer også i en ændring i de multifunktionelle regulatoriske og strukturelle roller af resulterende proteiner.

Der er, faktisk, en betydelig berigelse af GC-indhold (17 % og 25 % berigelser i henhold til henholdsvis Pfizer og Moderna sammenlignet med SARS-CoV-2) som resultat af den kodonoptimering, der var færdig, og "dette kan føre til sygdomsassocierede cellulære patologier, der involverer G4-quadruplexes" forbundet med prionsygdomme. Øget GC-indhold betydeligt ændrer mRNA sekundær struktur også, og dette kan også føre til ribosomal pause eller standsning.

Ud over de forventede problemer med kodonoptimering giver udskiftningen af ​​alle uridinerne til N1-methylpseudoridinerne i det mRNA, der anvendes til produktionen af ​​de injicerbare COVID-19-produkter, til højere utroskabsoversættelse af proteiner. Forfatterne hævder, at glatte sekvenser - lange serier af N1-methylpseudoridiner - inducerer rammeskift, hvorved ribosomet simpelthen glider over disse sekvenser for at flytte læserammen for at producere helt andre proteiner. Ifølge deres resultater skete dette omkring 8% af tiden. Hvis vi kontekstualiserer dette fund til in vivo menneskelige omgivelser, er antallet af afvigende proteiner, der kan blive produceret, svimlende.

En skrift fra University of Cambridge med titlen Forskere redesigner fremtidige mRNA-terapier for at forhindre potentielt skadelige immunresponser blev også skrevet. Meddelelsen fra dette resumé var, at den modificerede mRNA COVID-19 produktplatform kan reddes ved blot at forbedre de glatte sekvenser, der er ansvarlige for frame-shifting, ved at målrette dem og mutere de glatte kodoner.

Jeg vil ikke anbefale at glide ned ad denne meget glatte sekvensskrænt.

En note om proteinproduktion på og uden for mål

Jeg kan i hvert fald komme i tanke om to potentielt truende problemer vedrørende proteinproduktion i forbindelse med de COVID-19-modificerede mRNA-produkter.

1. On-target proteiner produceres med høj kvalitet
2. Off-target proteiner produceres med lav kvalitet

Potentialet for amyloidogen proteinproduktion er til stede i sammenhæng med on-target proteinproduktion. Det er blevet vist, at et konserveret coronavirus spike protein peptid danner amyloid nano-strukturer og hydrogeler under pH-afhængig (pH = 4) betingelser. Det er også blevet vist, at en molekylær mekanisme for potentiel amyloidogenese af SARS-CoV-2 S-protein hos mennesker lettes af endoproteolyse af neutrofil elastase.

Figur 1 viser, at der er mindst 8 amyloidogene peptider i spikeproteinet ifølge BNT162b2-koden. Min bekymring er, at i forbindelse med high fidelity-translation produceres mindst et af disse peptider og spaltes til amyloidogene peptider for at inducere proteinopati. Graden og typen af ​​skade vil afhænge af placeringen af ​​proteiner, der produceres.

Et endnu nyere fortrykspapir offentliggjort online den 9. december 2023 viser spontan dannelse af de amyloidlignende selvsamlende nanostrukturer af spike- og N-proteiner, der kan inducere proteinopati eller amyloidose. Dette betyder, at det er muligt, at spidsproteiner produceret i menneskelige omgivelser kan danne amyloider for at inducere neurodegeneration og andre patologier.

Potentialet for afvigende proteinproduktion er også til stede i forbindelse med off-target proteinproduktion som i den nyligt offentliggjorte Natur ovennævnte papir. Forfatterne viser, at off-target-proteiner bliver produceret i forbindelse med de COVID-modificerede mRNA-skud på grund af out-of-frame translation. Denne såkaldte 'rammeforskydning' forstærkes sandsynligvis af kombinationen af ​​kodonoptimering og udskiftning af uridiner til N1-methylpseudouridiner.

Det faktum, at der produceres off-target-proteiner, er meget bekymrende. Disse proteiner kunne inducere et utilsigtet immunrespons mod proteiner, der fører til autoimmunitet, især i sammenhæng med kimære spike-humane peptider.

Ved at kombinere 1. og 2. konceptuelt er molekylære mimicry-hotspots i spikeproteinet allerede blevet opdaget med autoimmunt potentiale i forbindelse med trombocytopeni. Et TQLPP-motiv i spikeproteinet har lignende antistofbindingsegenskaber som det humane protein thrombopoietin. Antistoffer krydsreaktion med trombopoietin kan inducere trombocytopeni, en tilstand, der observeres hos COVID-19-patienter. modificeret mRNA, der koder for spidsen i BNT162b2- og Moderna COVID-19-skuddene, efterlignes efter spidsproteinet fra SARS-CoV-2-virus.

konklusioner

I lyset af dette nye værk af Mulroney el al., er det klart, at disse produkter kræver tilbagekaldelse og undersøgelse. Det er mærkeligt, at producenterne havde alle muligheder og ressourcer til at vurdere farerne ved off-target proteinproduktion med henblik på efterfølgende forbedring – eller i det mindste belysning – af disse farer forudgående at injicere milliarder af mennesker med dem, men udnyttede ikke disse muligheder.

Måske skulle vi lytte til den evolutionære cellebiolog Allan Drummonds opfordring: "Venligst ikke abe med disse [kodon]-steder; de er optimeret af en eller anden grund," med henvisning til at udnytte kodonbias hos pattedyr til optimering.

Jeg er enig med Allan Drummond.

Stille beundring er en bedre tilgang end tavs mutation, og bestemt bør ydmyghed og ydmyghed gå forud for hybris.

Genudgivet fra forfatterens understak